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Estudio de la regulación de genes en células de alimentación de nematodos endoparásitos sedentarios para su futuro empleo como herramientas biotecnológicas de control.

  • García Ruiz, Alejandra
Los nematodos endoparásitos sedentarios de plantas producen importantes pérdidas económicas en la agricultura. Entre ellos destaca el género Meloidogyne, que afecta a una amplia variedad de cultivos y está ampliamente distribuido por todo el mundo. Estos nematodos seleccionan varias células del cilindro vascular de la raíz (4-8) y las modifican de modo que experimentan sucesivas mitosis con citocinesis incompletas, originándose varias células multinucleadas de gran tamaño denominadas células gigantes (CGs). Estas poseen numerosas invaginaciones de la pared celular adyacente al xilema, un citoplasma denso con un retículo endoplasmático muy desarrollado, y gran cantidad de orgánulos como mitocondrias, ribosomas y pro-plastidios. Los importantes cambios metabólicos y fisiológicos necesarios para poder formar estas células especializadas transcurren a través de un importante proceso de reprogramación génica de las células precursoras. El inicio del proceso de diferenciación de estas CGs parece que viene marcado por moléculas efectoras secretadas por el nematodo a las células precursoras mediante el estilete, pero los mecanismos moleculares implicados en la formación de estas estructuras celulares al servicio de la nutrición del nematodo, denominadas sitios de alimentación (nematode feeding sites, NFSs) son aún desconocidos en gran medida. Debido a que los medios de control de nematodos químicos y físicos más utilizados en agricultura no son totalmente efectivos, o están prohibidos o en fase de prohibición en la Unión Europea, el control mediante herramientas biotecnológicas basadas en plantas resistentes o tolerantes a nematodos se plantea como una opción necesaria. Una de estas estrategias pretende interferir directamente con el desarrollo de los nematodos, o con la formación de los sitios de alimentación, bien mediante la expresión de proteínas citotóxicas, o mediante el bloqueo de genes esenciales para el desarrollo de los mismos. En cualquier caso, la expresión del transgén debería estar lo más restringida posible a los sitios de alimentación. Para ello, se requiere el estudio pormenorizado de las regiones reguladoras de los genes (promotores), mediante el análisis de la activación de estos promotores en los NFSs y su posible disección y ulterior modificación, con el objetivo de aumentar su especificidad. Por este motivo, uno de los principales objetivos de esta Tesis Doctoral ha sido la identificación de promotores que se induzcan de forma específica en los sitios de alimentación y que presenten un patrón de expresión lo más limitado posible en el resto de los tejidos de la planta y a lo largo de su desarrollo, de forma que pudieran ser utilizados mediante estrategias biotecnológicas para el control de nematodos. Por ello, hemos analizado por una parte promotores de genes de la planta y por otra, de genes ajenos a esta, que podrían tener un patrón de expresión algo más restringido. Se ha completado el estudio del promotor del gen de choque térmico HaHSP17.7G4. En plantas transgénicas de tabaco, se había identificado una región mínima de 83pb que era suficiente para conferir actividad del promotor específicamente en CGs inducidas por M. javanica y que mantenía su actividad en respuesta a choque térmico y durante embriogénesis cigótica. En este trabajo hemos comprobado que esta versión corta del promotor de choque térmico (-83 HaHSP17.7G4) mantiene su actividad en CGs de Arabidopsis, así como después de choque térmico, pero no en embriogénesis tardía. Adicionalmente, mediante el análisis de la inducción del promotor G4 tras la infección con Globodera tabacum pudimos concluir que el promotor se induce específicamente por nematodos formadores de agallas, pero no de quistes. Se ha podido, por tanto, comprobar que la inducción de una versión mínima del promotor que contiene un elemento HSE (heat-shock element) de respuesta a nematodos de forma muy específica en CGs se conserva en diferentes especies de plantas, lo que podría resultar de gran utilidad para una posible aplicación biotecnológica, aunque restringida a los nematodos formadores de agallas. Además, los estudios con otros promotores de genes relacionados con la respuesta a embriogénesis tardía y choque térmico que codifican proteínas homólogas a las codificadas por el gen G4 sugieren que la respuesta a choque térmico está más asociada a la activación frente a nematodos que la de embriogénesis tardía. Por un lado, el promotor Hahsp17.6G1 (G1), que no responde a choque térmico pero sí en embriogénesis tardía, no se indujo en CGs, mientras que el promotor Hahsp18.6G2 (G2), que si se induce por choque térmico, se activó específicamente en CGs. Además, una versión mutada del promotor HaHSP17.7G4 (G4MutP) que presenta alta actividad tras choque térmico, pero que tiene afectada su actividad en embriogénesis tardía, se activó en CGs. Las respuestas de los diferentes promotores se correlacionaron con diferentes configuraciones de HSEs, que podrían estar implicados en la activación en CGs, probablemente a través de factores de transcripción del tipo HSF (Heat Shock Factor). Estos resultados, junto con la comprobación mediante inmunolocalización de que las proteínas de choque térmico de bajo peso molecular (small heat-shock proteins, sHSPs) de clase I se acumulan en el interior de CGs de tabaco, apoyan la idea de que las CGs inducidas por el nematodo representan un estado transcripcional muy similar al que se produce por choque térmico en lo que se refiere a este tipo de genes, y sugieren que las sHSP podrían tener un papel relevante en la formación o mantenimiento de las CGs. También hemos analizado la activación de promotores en sentido del virión del virus del estriado del maíz (Maize streak virus, MSV) y del virus del enanismo del trigo (Wheat dwarf virus, WDV). Mediante el análisis de diferentes líneas transgénicas de tabaco y Arabidosis que llevaban una fusión de estos promotores a la región codificante de la ß-glucuronidasa (GUS), se observó que el promotor MSV era activado en tejido vascular aéreo, fundamentalmente en floema de hoja, cotiledón y algunas estructuras florales. Sin embargo, en raíz, la activación del promotor se restringió a sincitios y a CGs, siendo esta indetectable en el resto de tejidos de la raíz. Con estos resultados podemos concluir que el promotor de MSV es específico de NFSs en la raíz, ya que no se detecta expresión en ningún otro tejido de este órgano. Además, esta conducta se ha observado en dos especies (tabaco y Arabidopsis), así como con los dos tipos de nematodos fitoendoparásitos más extendidos (formadores de quistes y agallas), lo que supone una importante ventaja, ya que podría utilizarse como herramienta común para ambos tipos de nematodos y para diferentes especies de plantas. Este estudio sugiere además que puede existir una cierta similitud entre el o los mecanismos de activación del ciclo celular de novo en las células de la planta mediado por geminivirus con el observado en CGs. Para poder llevar a cabo esta estrategia biotecnológica anti-sitios de alimentación, además de conseguir un promotor específico, también es necesario identificar genes esenciales para el desarrollo y/o mantenimiento de los NFSs, principalmente en los primeros estadios de su desarrollo, de forma que podamos obtener una batería de genes candidatos que puedan ser utilizados junto a los promotores específicos para bloquear el desarrollo de los NFSs. Para ello analizamos los cambios globales de expresión génica que se producen durante la diferenciación de las CGs mediante un estudio del transcriptoma de CGs en estadios tempranos de formación (3 días) frente a tejido vascular control en Arabidopsis. Utilizamos de manera combinada la hibridación de microordenamientos de ADN junto con la microdisección de GCs por laser. Gracias a esta combinación técnica, se han podido identificar 1161 genes diferencialmente expresados en CGs, de los que 851 mostraron menores niveles transcripcionales que el control, lo que indica que posiblemente ocurran mecanismos de represión génica en estadios tempranos del desarrollo de CGs que permitan su diferenciación en un tipo celular único. Mi principal contribución a este trabajo ha sido la hibridación en microordenamientos de ADN, ARN aislado de agallas diseccionadas a mano 3 días post-infección, frente a segmentos equivalentes de raíces control en el mismo estadio de crecimiento, gracias a lo que se pudo realizar la comparación del transcriptoma diferencial de CGs microdiseccionadas por láser con el de agallas diseccionadas a mano. De los 547 genes diferencialmente expresados en agallas frente a los segmentos de raíz control, solo 120 coinciden con los identificados en el transcriptoma diferencial de CGs, lo que confirma la dilución de los tránscritos de CGs en muestras de ARN de agallas. La clasificación de los genes exclusivos de CGs (que no se encuentran diferencialmente expresados en agallas) y genes distintivos de agallas (que no están diferencialmente expresados en CGs) en categorías funcionales nos ha permitido identificar procesos característicos de CGs, lo que indica la identidad molecular particular de estas células en relación a sus patrones de expresión génica en comparación con el resto de tejidos de la agalla. En general, los genes relativos a la modificación de pared son co-regulados en CGs y agallas. Por el contrario, genes relacionados con el metabolismo secundario, como los implicados en defensa o en síntesis de ligninas son reprimidos en CGs e inducidos en agallas. Un dato de alto interés es que solo 8 de los 100 genes diferencialmente expresados en CGs que codifican factores de transcripción se regulan de modo similar en agallas, lo que sugiere que las cascadas de transducción de señales que llevan a la formación de las GCs y del resto de los tejidos hipertrofiados de las agallas, son muy diferentes. Por último, hemos identificado un grupo de genes exclusivos de CGs en sus primeras etapas de desarrollo. Estos genes regulados de modo característico, junto con promotores génicos específicos del sitio de alimentación, podrían ser utilizados en estrategias biotecnológicas, expresándolos o reprimiéndolos en las células gigantes en plantas de interés agrícola para interferir en la formación de los NFSs. Estudios posteriores confirmarán su posible eficacia en este control.
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Componentes minioritarios y propiedades antioxidantes de aceites vírgenes y tortas residuales obtenidos por presión en frio a partir de fuentes vegetales convencionales y no convencionales.

  • Navas Hernández, Petra Beatríz
Componentes minoritarios y propiedades antioxidantes de aceites vírgenes y tortas residuales obtenidos por presión en frío a partir de fuentes vegetales convencionales y no convencionales Beatriz Navas Hernández, María Desamparado Salvador Moya y Giuseppe Fregapane Resumen En el presente trabajo se evaluaron las propiedades y composición química de aceites vírgenes obtenidos por prensado en frío a nivel de planta piloto, a partir de distintas fuentes vegetales, como semillas oleaginosas convencionales (soja, girasol, sésamo, colza y cártamo) y no convencionales (negrillo, perilla blanca, dos variedades de linaza, pepita de uva, cañamón, piñón y calabaza); además el aceite de los frutos de la palma amazónica de seje y de tubérculos de chufa. En todos los aceites vírgenes de semillas predominaron los ácidos grasos poliinsaturados, mientras que en los aceites de seje y tubérculos de chufa el ácido oleico. Con respecto a los contenidos de tocoferoles y tocotrienoles, el aceite virgen de pepita de uva fue el que presentó más variedad de isómeros, conteniendo el ¿, ß, ¿, ¿ tocoferol, además de ¿, ß y ¿ tocotrienol. La concentración de biofenoles totales osciló entre una ausencia total en el aceite de pepita de uva y 394 mg Kg-1 en el aceite virgen de soja, los ácidos fenólicos y flavonoides fueron identificados en cantidades variables, mientras que el ß-sitosterol fue el fitoesterol mayoritario en todos los aceites vírgenes obtenidos. La microextracción en fase sólida y la cromatografía de gases acoplada a la detección por espectrometría de masas, fueron los procedimientos utilizados para la identificación y cuantificación de los compuestos volátiles. Los resultados mostraron que los aceites provenientes de las semillas oleaginosas no convencionales exhibieron las mayores concentraciones de moléculas volátiles, con la presencia de cantidades variables de aldehídos, alcoholes, ácidos carboxílicos y terpenos; además, de ésteres y cetonas. En cuanto a la estabilidad oxidativa, bajo las condiciones de almacenamiento prolongado a temperatura de 25ºC, el aceite de sésamo resultó ser el más estable. Al aplicar la prueba de Rancimat, se pudo comprobar que la estabilidad oxidativa, medida como el tiempo de inducción, fue dependiente de la temperatura utilizada, siendo en este caso el aceite de girasol el más resistente a la oxidación, con un período de inducción de 13,5 horas bajo las condiciones de 120ºC y 20 l/h de flujo de aire. La actividad antirradical de las tortas residuales provenientes de la extracción de los aceites vírgenes también fue evaluada a través de la prueba del radical DPPH, siendo la torta residual de uva y la de girasol las que presentaron la mayor capacidad antirradical. La actividad antioxidante de las tortas residuales de uva y girasol fue evaluada en aceites purificados de maíz, girasol y soja en ensayos de almacenamiento en estufa a 25 y 50ºC y fue comparada con la de antioxidantes como el ¿-tocoferol y hidroxitirosol. Los resultados demostraron que los extractos de las tortas residuales de uva y girasol constituyen fuentes potenciales de antioxidantes naturales contra la autooxidación de aceites vegetales. Palabras claves: aceites vírgenes, composición química, estabilidad oxidativa, tortas residuales, propiedades antioxidantes.
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Nuevas aportaciones analíticas para el screening y control de contaminantes y tóxicos agroalimentarios.

  • Andrés Segura, Fernando de
La presente Tesis Doctoral recoge los resultados, discusiones, y conclusiones que se han obtenido durante las investigaciones llevadas a cabo en el período de realización de la misma. Se trata de nuevas aportaciones analíticas para el screening y control de contaminantes ambientales y tóxicos agroalimentarios. Los trabajos se han realizado en el Departamento de Química Analítica y Tecnología de los Alimentos de la Universidad de Castilla-La Mancha. Dicha Tesis está estructurada en una INTRODUCCIÓN GENERAL donde se aborda la importancia del estudio de los contaminantes ambientales y los tóxicos agroalimentarios, así como la importancia de una adecuada elección de la metodología analítica a emplear, los aspectos metrológicos a considerar y los conceptos relativos a la validación que se debe realizar de las metodologías propuestas en los capítulos experimentales, ya sean análisis cualitativos o cuantitativos. En este sentido, se añade un Anexo con información de interés sobre la importancia de la incertidumbre en los análisis cuantitativos y cualitativos. Adicionalmente, en cada capítulo, se han llevado a cabo introducciones más específicas y detalladas. En el PRIMER CAPÍTULO se detallan los materiales empleados y la instrumentación manejada para llevar a cabo todos los trabajos experimentales, con un Anexo de revisión bibliográfica y teórica acerca de la técnica de extracción con fluidos supercríticos y la cromatografía de fluidos supercríticos empleados para el bioanálisis. Los tres siguientes capítulos proporcionan el núcleo central de resultados de esta Memoria, compilados en estilo de publicación (en inglés). El SEGUNDO CAPÍTULO de esta Memoria, titulado METODOLOGÍAS PARA LA DISCRIMINACIÓN TOXICOLÓGICA DE ENANTIÓMEROS, está integrado por los resultados obtenidos en dos trabajos experimentales: i) Empleo de ensayos de toxicidad para la discriminación enantiomérica de productos farmacéuticos. ii) Determinación de enantiómeros de carnitina en suplementos dietéticos y productos farmacológicos mediante cromatografía líquida quiral acoplada a la detección por dicroísmo circular. En el TERCER CAPÍTULO, cuyo título es METODOLOGÍAS ANALÍTICAS PARA EL CONTROL DE TÓXICOS AGROALIMENTARIOS, se incorporan los resultados experimentales de dos estudios realizados con micotoxinas y aminas heterocíclicas empleando separaciones cromatográficas y distintos sistemas de detección: i) Detección electroquímica en el caso de las micotoxinas en muestras de orina de cerdo, bovina y humana. ii) Por dispersión de luz en el caso de aminas heterocíclicas polares en muestras de orina humana. En el CAPÍTULO CUARTO, titulado METODOLOGÍAS ANALÍTICAS DE SCREENING CONFIRMACIÓN BASADAS EN TRATAMIENTO DE MUESTRAS MEDIANTE EXTRACCIÓN CON FLUIDOS SUPERCRÍTICOS Y TÉCNICAS DE SEPARACIÓN CAPILAR se incluyen dos trabajos experimentales con dos técnicas de separación diferentes, distintos tratamientos previos de muestra y detección por fluorescencia en ambos estudios: i) Determinación de aminas heterocíclicas apolares mediante extracción con fluidos supercríticos y posterior separación por electroforesis capilar y detección por fluorescencia de dichas aminas en muestras de carne. ii) Screening de aminas heterocíclicas apolares a través de la detección por fluorescencia, así como la confirmación de muestras positivas por fluorescencia en muestras de orina humana. Tras estos capítulos experimentales se presenta un último apartado de CONCLUSIONES, donde se reflejan los hitos más relevantes, tanto a nivel general como conclusiones específicas derivadas del conjunto de investigaciones que han formado parte de esta Memoria.
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Perfiles de flavonoles y otros compuestos flavonoideos para la autenticidad y diferenciación varietal de uva (v. Vinifera) y vino.

  • Castillo Muñoz, Noelia
AUTENTICIDAD Y DIFERENCIACIÓN VARIETAL DE UVA Y VINO (V. vinifera) MEDIANTE PERFILES DE FLAVONOLES Y OTROS COMPUESTOS FLAVONOIDEOS La utilidad de los perfiles de flavonoles como una característica de la variedad de la uva y del vino elaborado a partir de ella está ligada a la inequívoca y completa identificación de los principales flavonoles encontrados en ella. En los últimos años, han persistido importantes dudas acerca de la asignación correcta de la fracción glicósido de algunos flavonoles hallados en uvas y vinos procedentes de V. vinifera. Otra importante cuestión tenía que ver con la identificación de nuevos flavonoles derivados de agliconas diferentes de kaempferol, quercetina, miricetina e isoramnetina, una cuestión que necesita ser evaluada cuidadosamente. Las dudas anteriormente planteadas están relacionadas con el hecho de que el estudio de los flavonoles de la uva y del vino no se ha desarrollado de una forma tan intensa como el de otros compuestos fenólicos, como es el caso de los antocianos. Los flavonoles son unos pigmentos amarillos cuyo estudio normalmente se ha desarrollado a partir de los cromatogramas de HPLC obtenidos a longitudes de onda en torno a los 360 nm. Desafortunadamente, a 360 nm otros compuestos fenólicos de la uva y del vino (v.g. ácidos hidroxicinámicos y los propios antocianos) tienen importantes absorbancias residuales que introducen notables interferencias en los cromatogramas a 360 nm. El primer objetivo de esta Tesis Doctoral fue el desarrollo de un método de preparación de muestra y de separación cromatográficos adecuados para el estudio de los flavonoles de la uva y del vino. Esta metodología de análisis se ha aplicado a la identificación de la serie completa de flavonoles 3-O-glicósidos (en relación tanto al tipo de estructura flavonoidea como a los tipos de glicósidos) que son la forma en que los flavonoles se encuentran en variedades de uva de V. vinifera, tanto tinta como blanca. Otra aplicación de esta metodología de análisis ha sido el estudio de la biosíntesis de los flavonoles en la uva, con la finalidad de poder establecer la fase de maduración de la baya de uva en la cual queda establecido el perfil de flavonoles representativo de esa variedad. El segundo objetivo perseguido en esta Tesis Doctoral ha sido evaluar la capacidad de los perfiles de flavonoles como herramienta para la diferenciación y la autenticidad varietal, tanto para la uva como para los vinos monovarietales. Se ha estudiado la transferencia de los perfiles de flavonoles característicos de la uva al vino durante la vinificación, al igual que los cambios introducidos en éstos como consecuencia de la hidrólisis sufrida, en menor o en mayor medida, por los flavonoles 3-O-glicósidos originales de la uva. También se han investigado algunas de las posibles causas de ésta hidrólisis. Por último, se ha considerado de interés el estudio de la composición fenólica relacionada con el color rojo de las uvas y vinos de la variedad Garnacha Tintorera, una de las pocas variedades de uva V. vinifera que muestra la pulpa de la baya coloreada de rojo. Los vinos elaborados a partir de esta singular variedad de uva son intensamente coloreados y muestran una fuerte contribución de la copigmentación de sus antocianos al color del vino, debido muy probablemente a la concurrencia de altas concentraciones de antocianos (pigmentos) y de copigmentos (como son los flavonoles). A raíz de este estudio se han podido identificar algunos antocianos no encontrado con anterioridad en uvas de V. vinifera, por lo que han sido sugeridos como marcadores químicos de esta particular variedad de uva y sus vinos. La elucidación de la estructura de los antocianos mencionados ha requerido la combinación de varias técnicas de separación cromatográfica (Cromatografía en Contracorriente a Alta Velocidad, Cromatografía en Columna, y HPLC Semipreparativa) y de análisis cromatográfico y espectroscópico (LC-DAD, LC-MSn, GC-MS, 1H- y 13C-NMR).
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Nuevas aportaciones en la automatización y miniaturización de sistemas analíticos de screening.

  • Plata Torres, María Reyes
vTITULO: NUEVAS APORTACIONES EN LA AUTOMATIZACIÓN Y MINIATURIZACIÓN DE SISTEMAS ANALÍTICOS DE SCREENING Presentada por: Mª Reyes Plata Torres La miniaturización y simplificación de herramientas y procesos analíticos son tendencias básicas de la Química Analítica siendo objeto de un importante número de trabajos de investigación. Cuando se complementa con la automatización se consiguen sistemas que mejoran el comportamiento analítico, presentan tiempos de análisis muy pequeños y permiten el desarrollo de instrumentación económica. Estos sistemas analíticos miniaturizados y automatizados se pueden aplicar al screening de muestras, es decir, sistemas que clasifiquen dichas muestras en función de una respuesta binaria (muestras positivas o negativas). Con la presente Tesis Doctoral se pretende contribuir al desarrollo de dichas tendencias a través de nuevos métodos de screening que permitan el análisis previo de muestras reales en tiempos cortos, medidas in situ y con un bajo coste lo que implica métodos automatizados y miniaturizados. Así, el Capítulo II centra su interés principalmente en la puesta a punto de nuevas metodologías que permitan crear sistemas analíticos de respuesta rápida, como son los spot test y los ensayos de biotoxicidad, para que puedan ser utilizados como métodos de screening de muestras con el fin de simplificar el proceso analítico. Con el Capítulo III se obedece a las tendencias de miniaturización y automatización desarrollando métodos analíticos que utilizan sensores piezoeléctricos integrados en sistemas de flujo para llevar a cabo recuentos de bacterias y determinación de carbonatos en suelos. También se presenta una revisión bibliográfica donde se expone el estado actual en cuanto al desarrollo y aplicación de sensores dentro de la Química Analítica en España. Y por último el Capítulo IV centra su atención en la puesta a punto de metodologías simplificadas que utilizan diferentes técnicas de separación y detección para determinar y caracterizar polímeros del tipo polietilenglicol.
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La gestión del riesgo de interés de renta fija sujetos al riesgo de insolvencia.

  • Escribano Sotos, Francisco
El objetivo de la tesis es analizar el efecto que tiene la inclusión del riesgo de insolvencia y su efecto en el riesgo de interés, analizar el efecto de la inclusión de activos sujetos al riesgo de insolvencia en la gestión del riesgo de interés, y aportar herramientas y modelos validos para la gestión de carteras que contengan dichos activos y sean apropiados al mercado español. Para alcanzar los objetivos descritos, el trabajo de investigación se ha estructurado en tres partes que comprende seis capítulos, destinándose un capitulo adicional a las conclusiones. La primera de ellas, se dedica a la descripción de los mercados de renta fija arriesgada de España, los aspectos claves de este mercado y una clasificación de los modelos de valoración de activos que incorporan el riesgo de insolvencia. La segunda parte estudia la gestión del riesgo de interés para carteras de rente fija arriesgada, a través de los distintos modelos que utilizan la duración arriesgada como herramienta útil. A partir de las limitaciones que tiene el uso de la duración, que considera movimientos paralelos de la estructura temporal de los tipos de interés y variaciones de pequeño tamaño en los mismos, se propone un modelo alternativo que supera las limitaciones de la duración de tercera parte, de naturaleza empírica, se aplica al modelo propuesto al mercado español utilizando distintas metodologías. De esta manera se determina si la sensibilidad de los bonos arriesgados del mercado español durante el periodo analizado, frente a las variaciones de los tipos de interés, es mayor o menor que la de los títulos no sujetos al riesgo de insolvencia.
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Efectos del conocimiento y la similitud entre alternativas sobre las estrategias y la calidad de la decisión en el consumidor: Un enfoque de proceso

  • Gómez Borja, Miguel Ángel
La investigación analiza los efectos del conocimiento y similitud entre alternativas sobre las estrategias de decisión así como sobre la calidad de la decisión del consumidor desde un enfoque contingente de procesamiento de la información, desarrollando una metodología de seguimiento del proceso explícitamente para la investigación. La caracterización del conocimiento previo se realiza a través de una diferenciación a priori entre individuos expertos e inexpertos mientras que la similitud entre alternativas se define en función de la variabilidad de los valores de las características que definen a las alternativas. Asimismo, se definen y delimitan dimensiones relevantes de las estrategias de decisión y la calidad de la decisión, haciendo un especial hincapié en el concepto de calidad de la decisión, haciendo un especial hincapié en el concepto de calidad en el proceso de decisión. Partiendo de este esquema conceptual se plantea un diseño experimental y se utiliza una herramienta informática que permite simular y registrar el proceso de adquisición de información diseñada especialmente para la investigación, y denominada SSPD.Tras una aplicación al problema de selección de un préstamo hipotecario, se constatan unos efectos generalizados e importantes de la experiencia sobre las dimensiones dependientes analizadas
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PNAL: Un modelo algebraico para procesos probabilísticos y no deterministas

  • Cazorla López, Diego
En esta tesis presentamos un modelo algebraico para procesos probabilísticos y no deterministas (pnal), que extiende el modelo epl de m. Hennessy (algebraic theroy of processes, mit press, 1988). La sintaxis de pnal es una extensión de la epl que mantiene los dos operadores clásicos de elección (elección interna y elección externa) y además introduce un nuevo operador de elección, la elección probabilística. Hemos definido la semántica operacional de pnal por medio de un sistema de transición etiquetado en donde aparecen 3 grupos de reglas de transición, cada uno de los cuales está relacionado con uno de los tipos de transición posibles: probabilística, observables y no observables. Tomando como base la semántica operacional, definimos una semántica de pruebas que consiste, como es habitual, es estudiar las respuestas de los procesos a los tests. La existencia en nuestro modelo de una elección probabilística introduce una nueva variable en el problema, ya que ahora no nos bastara con saber si un proceso puede o debe satisfacer un test, sino que ahora debemos generalizar el problema y calcular con que probabilidad (o conjunto de probabilidades) un proceso satisface un test. Posteriormente hemos definido una semántica denotacional en la que los objetos del dominio semántico, los árboles de aceptación probabilísticos o pat, constituyen una extensión muy intuitiva de los arboles de aceptación at definidos. Se han obtenido de los resultados: en primer lugar que procesos equivalentes en epl siguen siéndolo en nuestro modelo, y en segundo lugar que la semántica denotacional y la semántica de pruebas identifican los mismos procesos. Finalmente, se aborda el estudio del sistema de axiomas y reglas. Tomando como punto de partida el sistema de prueba para epl, hemos estudiado que ecuaciones, inecuaciones y reglas seguían siendo validas en el caso probabilístico. Posteriormente hemos añadido los axiomas relacionados con el operador de elección probabilística. Asimismo, se ha probado la corrección y completitud del sistema de prueba presentado.
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Nuevas Aplicaciones de 1,1'-Metilenbis (1H-1,2,4-triazol) en Síntesis y en Química de Carbenos y Dendrímeros

  • Rodríguez Curiel, René Ignacio
En la memoria de esta tesis doctoral se recoge, dividido en tres capítulos bien definidos, tres clases de aplicaciones sintéticas del 1,1'-metibenbis (1h-1, 2,4-triazol), basadas en las posibilidades de reacción que presenta. En el primer capítulo se describe un método que permite la preparación de 1, 2,4-triazoles-4-sustituidos, de manera eficiente y en condiciones neutras. El segundo capítulo se dedica a la síntesis de complejos carbónicos mono y dinucleares de paladio (II) derivados de 1,1'-metilenbis (1h-1, 2,4-triazol). Se presenta un estudio de difracción de rayos x que permite confirmar las estructuras propuestas y se realiza un análisis del comportamiento dinámico en disolución de ambas clases de complejos de paladio (II). Por último, en el tercer capítulo se obtiene un dendron derivado del 1,1'-metilenbis (1h-1, 2,4-triazol) sustituido en el puente metilenico, con el cual se preparo un dendrimero de primera generación que presenta este sistema bisheterociclico en la superficie. La funcionalización de los anillos de 1,2,4-triazol situados en la periferia permitió la síntesis del primer metalodendrimero carbenico n-heterocíclico estabilizado con paladio(II), que se conoce hasta el momento.
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La solidaridad interterritorial en el sitema de financiación de las Comunidades Autónomas

  • Lagos Rodríguez, Mª Gabriela
Esta tesis doctoral constituye un análisis integral y sistemático del principio de solidaridad interterritorial en la financiación de las comunidades autónomas. Los objetivos planteados fueron averiguar si la configuración del principio de solidaridad en nuestro ordenamiento es acorde o no al concepto ético y jurídico del mismo, y comprobar si el sistema de financiación autonómica acoge de manera efectiva dicho principio y sus manifestaciones económicas. Con los fines citados, la tesis se estructura en tres capítulos primeros de contenido teórico, en los que se analiza el principio en las tres proyecciones genéricas que nos interesan - éticos, jurídicos y económicos - , su recepción en el ordenamiento español y los instrumentos existentes para su aplicación. En el cuarto se analizan los citados instrumentos desde el punto de vista económico y financiero, y por último se ofrecen las conclusiones más relevantes obtenidas de la investigación, la bibliografía utilizada y un anexo con los datos de financiación autonómica empleados.
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