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Experimental Procedures for Supplemental Figure: Double-stranded Zic2 and Zic2 mutant decoy DNA were prepared by annealing complementary single strands with the follow sequences: 5′-TCTTGGGTGGTCTCCGGAGACCACCCAAGA (for Zic2 decoy) and 5′-TCTTGAGTGAACTCCGGAGTTCACTCAAGA (for Zic2M decoy) as a negative control (Mizugishi et al., 2001). We utilized unlabeled and also Texas-red-tagged oligonucleotides (Invitrogen) to monitor DNA entry into cells. The terminal four bases on either site of the molecule were linked by phosphorothioate esters for added stability. Retinal explants were exposed to serial concentrations (0, 10, 100, and 200 μM) of decoy DNA combined with serial concentrations of serum-free medium (SFM) plus Fungene 6 transfection reagent (Roche) and incubated for 1 hr 30 min at 37°C. The explants were then washed several times in SFM, plated on D-polylysine/laminin, and incubated at 37°C, and dissociated chiasm cells were added to the cultures 2 hr later. They were then immunolabeled with α-neurofilament and explant outgrowth quantified, as indicated in Experimental Procedures., Figure S1. Zic2 Is Necessary for Ventrotemproal (VT) RGCs to Respond Negatively to Cues from the Chiasm Midline In Vitro. (A) Retinal explants grown on dissociated chiasm cells and immunostained with α-neurofilament. Representative images of dorsotemporal (DT) (a–d) and VT (e–h) retinal explants that were untransfected (a and e) or incubated with lipofectamine (b and f), Zic2 decoy oligos (c and g), or Zic2-mutant-decoy oligos (d and h) and subsequently cocultured with dissociated chiasm cells. Scale bar: 100 μm. (B) Quantification of area occupied by axons of DT (black columns) or VT (white columns) retinal explants that were untransfected or incubated with lipofectamine, Zic2-decoy oligos, or mutant-Zic2-decoy oligos, and then cocultured with dissociated chiasm cells. Left panels and graph: transfection of Zic2-decoy oligos does not affect the outgrowth in DT neurites (p > 0.2). Right panels and graph: transfection of Zic2-decoy oligos leads to increased growth of VT neurites. (*p < 0.05 compared with VT explants incubated with the lipofection agent alone or transfected with Zic2M-decoy). Number above bars indicates number of explants., Peer reviewed

Analytical and spectral characterization data of all new compounds, NMR/NOESY interprotonic distances, and crystallographic data (CIF)., Peer reviewed

Los reyes visitaron la sede central del Instituto Cervantes, en Alcalá de Henares, para conocer las iniciativas desarrolladas en la promoción de la enseñanza del español y la difusión de la cultura en español en el mundo. Sofía de Grecia, reina consorte de España sentada firmando, mientras Juan Carlos de Borbón, rey de España habla con Jon Juaristi, director del Instituto Cervantes

Los reyes de España visitaron ayer la sede central del Instituto Cervantes, en Alcalá de Henares, para conocer las iniciativas desarrolladas en la promoción de la enseñanza del español y la difusión de la cultura en español en el mundo. Plano medio sentados a la mesa, de izquierda a derecha Juan Carlos de Borbón, rey de España; Sofía de Grecia, reina consorte de España; Jon Juaristi, director del Instituto Cervantes y Pilar del Castillo, ministra de Educación, Cultura y Deporte

II Congreso Internacional de la Lengua Española (CILE) celebrado en Valladolid. Plano general, en la mesa, de izquierda a derecha, Jon Juaristi, director del Instituto Cervantes; Tomás Villanueva, Vicepresidente de la Junta de Castilla y León; Josep Piqué i Camps, Ministro de Asuntos Exteriores y Cooperación; Javier León de la Riva, alcalde de Valladolid; Pilar del Castillo Vera, ministra de Educación, Cultura y Deporte; Victor García de la Concha, filólogo español; Jesús Antonio Cid, presidente de la Fundación Menéndez Pidal.

II Congreso Internacional de la Lengua Española (CILE) en Valladolid. Plano medio, en la mesa, de izquierda a derecha, Josep Piqué i Camps, ministro de Asuntos Exteriores y Cooperación; Javier León de la Riva, alcalde de Valladolid; Pilar del Cartillo Vera, ministra de educación, cultura y deporte.

Toma de posesión de Jon Juaristi como director del Instituto Cervantes. Plano medio, de izquierda a derecha: Pilar del Castillo, ministra de Educación, Cultura y Deporte del Gobierno de España; Jon Juaristi, director del Instituto Cervantes y Fernando Rodríguez Lafuente, director saliente del Instituto Cervantes.

Toma de posesión de Jon Juaristi como director del Instituto Cervantes. Plano medio, de izquierda a derecha: Jon Juaristi, director del Instituto Cervantes y Fernando Rodríguez Lafuente, director saliente del Instituto Cervantes.

Acto de inauguración del Aula del Instituto Cervantes en Hanoi. Plano general, centrados, de izquierda a derecha: Rodrigo Rato, vicepresidente del Gobierno de España, y en el centro de la imágen Hoang Van Nghien, alcalde de Hanoi.

Acto de inauguración del Aula del Instituto Cervantes en Hanoi, en primer plano descubriendo la placa, Rodrigo Rato, vicepresidente del gobierno de España.